【摘要】 細胞是生物體基本的結構和功能單位，也是生命活動的基本單位。細胞模型已經成為藥物篩選和疾病研究最常用、也最基礎的生物平台。以細胞健康測定為例，以螢光標定後，可結合如微孔盤測讀，顯微影像或流氏系統進行定量分析。 【螢光法】 螢光法 是一種染色標定的策略，利用分子團可吸收特定波長的激發光 (Excitation) ，短暫維持後逸散出發射光 (Emission) 的特性 ( 圖 1& 圖 2) 。配合光學儀器的濾片篩選 ( 圖 3) ，將受標定的目標顯示出來。因為未被標定的背景及物體無法發光，可以大幅提昇觀測的靈敏度及動態範圍，特別適合用來觀測細胞，甚至次細胞層級的細微構造及變化。 細胞活力 從不同的切入點量測細胞健康/活力狀態，可以提供研究者更有效的資訊去評估諸如候選藥物反應，作用途徑的活化/抑制因子，報導基因等。這裡使用Calcium AM染劑為例，它是一種活細胞用的螢光細胞染劑，有絕佳的細胞膜穿透力。染劑進入細胞後，會被酯酶水解為Calcein，發出強綠色螢光。Calcein AM的另一優勢是的細胞毒性極低，非常適合於長時間活細胞實驗。 應用上也會搭配Ethidium homodimer（如EthD-III）等同時檢測細胞死亡事件。EthD-III本身幾無螢光，也不能通透細胞膜，但一旦細胞膜完整性破壞，EthD-III就可滲入並和核酸相結合，發出明亮的紅色螢光。Calcein AM與EthD-III同時使用，可以更靈敏的反應細胞群體的活力狀態，不受起始細胞密度誤差的影響，適用于高通量藥物毒性和細胞增殖分析。 【範例】以SpectraMax® iD3檢測細胞活力狀態 以SpectraMax iD3進行觀測及記錄，並以SoftMax Pro內建的EarlyTox範本進行後續分析。 【實驗材料及方法】 這裡推薦採用Molecular Devices提供的免洗式EarlyTox系列試劑盒，包括 · EarlyTox Live Cell Assay kit (P/N R8342標準包或P/N R8343重量包) · EarlyTox Glutathione Assay Kit (P/N R8344標準包或P/N R8345重量包) · EarlyTox Caspase-3/7 R110 Assay Kit (P/
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