Molecular Devices

  【簡介】 　　與傳統的2D培養模型相比，3D腫瘤球(3D cancer spheroid)模型因為能夠更佳模擬生物體內的組織結構、基因表達和代謝情況而越來越受歡迎 1,5,6 。先前的研究顯示，3D培養能表現出多種體內腫瘤特徵，如細胞與細胞或細胞與細胞外基質(ECM)交互作用、藥物穿透率、藥物反應與抗藥性 7 。與實體腫瘤相似，腫瘤球由外層細胞增生區、中層靜止細胞和內部處於缺氧狀態的壞死核心細胞組成。這些相似之處表明3D模型將有助於更好地評估藥物安全性，並有助於成功挑選出抗腫瘤化合物 4 。 　　針對培養3D細胞球已經開發出各樣的技術，不外乎使用 『抗細胞附著表面』 或 『物理性促進細胞與細胞的交互作用』 這兩類方法。 『旋轉培養瓶法』 (NASA生物反應器系統)採用連續轉動來防止細胞粘附在培養瓶表面，從而促進細胞與細胞之間的粘附。 『磁懸浮法』 利用磁場將含有奈米顆粒的氧化鐵細胞團簇在一起形成球狀體。而旋瓶法和磁懸浮法會產生大量的細胞球，均勻性差、球形體比例低 2 。 『懸滴法』 是將細胞懸浮液滴在培養皿的底部。然後將液滴中形成的球狀體轉移到細胞培養盤中進行進一步的檢測。但這項技術耗時耗力，若無自動化系統協助，只限用於小範圍內研究和應用。 　　當前則更盛行使用鍍有低貼附性材料的 『U形底微孔盤』 ，這種無支架的方法提供了相對簡單的工作流程，細胞球尺寸易於控制、球體的均勻度高 2 ， 但缺點是在每個孔中只能生成一個細胞球。因此需要使用很多孔來增加資料量，不但耗時且大幅增加試劑和測試化合物的篩選成本。通常會結合 併用 one step染色法及 高內涵技術 來優化工作流程，以有效減少分析時間及誤差 3 　　如對通量有更高的要求，可以考慮採用如 『康寧 ® Elplasia ® 微孔盤』 (6孔、24孔、96孔) 。其在盤內設計有微腔，並在底部處理極低貼附性塗層，以利形成細胞球。與標準U底盤相比，Elplasia 96孔盤平均每個孔可生成>78個球體。這允許在相同的條件下生長和處理更多細胞球，進一步發揮高內涵的資料輸出能力。特別適合用於研究腫瘤組織的異質性，增加用於基因表達或代謝組學分析的材料數量 5,8 。   　　本文將演示Elplasia 96孔盤的應用以及完整的3D細胞分析流程，包括前端細胞球培養/生成、化合物/染色處理、及後端以ImageXpress

Cathy Olsen, PhD | Sr. Applications Scientist | Molecular Devices Sophia Hsieh, PhD | Sr. Field Applications Scientist | Molecular Devices Chao-Min Cheng, PhD | Professor & Director | Institute of Biomedical Engineering, NTHU -快速檢測中和抗體的解決方案 SARS-CoV-2新冠肺炎病毒引起的全球大流行，如何快速監測接種疫苗後所產生的免疫反應是否能中和病毒，也就是受試者接種疫苗後的血清中和抗體平均效價，是一個有效的重要參數。日前陸續出現新冠肺炎變種病毒株，使得快速測試疫苗接種者體內中和抗體變的更為重要。 傳統的人類血清中和抗體的檢測，像是Plaque Reduction Neutralization（PRNT）方法，需使用活的病毒感染細胞，BSL-3級實驗室和大量的細胞培養工作，且結果分析過程非常費時，難以自動化。有人改用假病毒中和測試法（pVNT），使能在BSL-2級實驗室中進行， 但仍需要細胞培養和螢光成像以測量中和活性，因此也無法滿足高通量篩選的要求。GenScript cPass™ SARS-CoV-2是一種無病毒中和測試的檢測法（sVNT），採用ELISA技術，能夠克服傳統病毒中和檢測的障礙，實驗自動化大量篩檢。使用GenScript cPass™SARS-CoV-2中和抗體檢測試劑組搭配Molecular Devices系列軟硬體自動化產品可於短時間內快速篩檢疫苗接種者血清中的中和抗體，可提供一個快速檢驗疫苗效力的檢測平台。 【實證研究】 由清華大學生物醫學工程研究所鄭兆珉教授及高雄醫學大學婦產部沈靜茹醫師所率領的團隊，正是使用這樣的方式對29位接種莫德納（Moderna mRNA-1273）疫苗孕婦以及新生兒的臍帶血進行快速又精準的檢測。 GenScript cPass™SARS-CoV-2的作法是：將能辨認棘狀蛋白HRP-RBD（HRP-conjugated spike protein receptor-binding domain）的抗體和可能含中和抗體的待測者血清相