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【COVID】利用全自動化設備加速重組蛋白疫苗與中和抗體開發

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【簡介】 疫情肆虐超過一年,COVID對生命及生活威脅仍未消除,如何加速疫苗及治療藥物的開發,是人類對病毒戰爭中最重要的課題。Molecular Devices作為生命科學研究陣營的一員,將與您併肩作戰,提供最佳的服務和工具,加速相關的研究發展。   本文將著重在重組蛋白疫苗開發和篩選中和抗體的自動化解決方案,逐一介紹免疫抗原發現和改造、噬菌體展示技術(Phage display)和雜交瘤技術(Hybridoma)的抗體開發、以及重組蛋白/抗體生產用細胞株開發的工作流程。   一. 抗原開發和改良流程 不同的疫苗開發平臺(比如滅活病毒與DNA疫苗)需要的工作流程不盡相同,各有各的優勢。CEPI(Coalition for Epidemic Preparedness Innovations)以及其他類似機構,在全球性流行病中推動多樣化的對策以增加對抗感染源的成功率。這裡,我們重點介紹利用重組蛋白作為免疫原開發疫苗的通用工作流程,以及Molecular Device能提供加速您研究工作的系統。  1.篩選免疫原 採用Phage display篩選病毒抗原,發現潛在的疫苗候選物。 2.免疫原表徵分析 免疫原性狀研究確認上述步驟發現的抗原是否能激發免疫反應。 若所選抗原能成功激發免疫反應(常用ELISA檢測),這個抗原即可被認為候選免疫原而繼續進行更多的表徵工作, 並且在後續的蛋白質改造工程中將此目標屬性引入免疫原。 3. 蛋白質(免疫原)改造工程 免疫原的一些屬性會導致注射入動物或人後出現不良反應。因此,需要使用一些基因編輯工具,如CRISPR/Cas9,改造免疫原的DNA基因,從而消除這些屬性。 4.細胞轉染和建立克隆 DNA序列優化完成後,需要放大免疫原的生產用於後續測試。在這個階段,構建高表達、單 株源性的細胞株非常關鍵。這個階段涉及基因工程、轉染以及單細胞克隆,尤其是採用哺乳動物細胞株作為宿主細胞。 5.篩選表達量和品質屬性 在單細胞克隆後,監測細胞的生長並評估表達量。純化並製備免疫原用於動物注射以激發免疫反應。待動物產生抗體後,通過病毒中和試驗評估疫苗效力。   二、基於Phage display技術的抗體發現流程 Phage display是一種用於研究展示於噬菌體表面的蛋白與另一個分子如peptide、DNA或者其他蛋白質相互作

【應用專輯】90分鐘完成ELISA檢測可行嗎?

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【簡介】 眾所周知,目前人類許多疾病的發生過程都或多或少與細胞因子(Cytokine,CK)變化有關係,如腫瘤、糖尿病、神經退行性疾病等等。細胞因子其實就是一類能在細胞間傳遞資訊,可分為白細胞介素、干擾素、 腫瘤壞死因子、集落刺激因子、生長因子和趨化性細胞因子等六類。 正常情況下,細胞因子的表達和分泌受身體嚴格的調控,但在病理狀態下,細胞因子會出現異常性表達。例如細胞信號轉導通路的變化,其發生過程涉及到細胞膜或細胞內受體接受細胞外的分子信號刺激,這些細胞外的分子信號就包括細胞因子、激素、生長因數等等,我們可以通過正常情況下,細胞因子的表達和分泌受身體嚴格的調控,但在病理狀態下,細胞因子會出現異常性表達。例如細胞信號轉導通路的變化,其發生過程涉及到細胞膜或細胞內受體接受細胞外的分子信號刺激,這些細胞外的分子信號就包括細胞因子、激素、生長因數等等,我們可以通過細胞因子的檢測來診斷某種疾病的發生。   主流的細胞因子數檢測包括 免疫學檢測方法 生物學檢測方法 分子生物學檢測方法 三種檢測方法各有優劣,例如生物學檢測方法中利用動物模型來檢測細胞因數的含量變化,可反映動物體內生物活性、參考價值大,不足之處在于成本較高、步驟繁瑣等,所以應用較少。目前較為被大家所常用的方法是三種檢測方法各有優劣,例如生物學檢測方法中利用動物模型來檢測細胞因數的含量變化,可反映動物體內生物活性、參考價值大,不足之處在于成本較高、步驟繁瑣等,所以應用較少。目前較為被大家所常用的方法是免疫學檢測法和和分子檢測法。 而其中免疫學檢測方法更為常用。包括 ELISA法、免疫斑點法、免疫螢光法、RIA檢測方法 等,其中最廣泛使用的就是ELISA法。與之配套檢測的多功能光譜分析儀/檢測系統,因其具有光吸收、螢光、發光、螢光偏振和時間分辨螢光等多種檢測功能,我們不僅可以利用其光吸收功能針對細胞因子進行ELISA,也可借助其螢光功能或螢光偏振功能針對微量表達的細胞因子進行高通量、高靈敏度的檢測。市面上已相繼開發出針對不同需求不同目的應用的ELISA試劑盒。 Sword ELISA Boosters 由 Sword Diagnostics 公司開發出的新一代螢光ELISA 檢測技術,它可直接替代作為傳統的光吸收 ELISA 檢測試劑,將由 Swo

【應用專輯】微孔盤分析儀在農業及植物研究的應用實例

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【簡介】 近年來,隨著氣候異常加劇,各國無不紛紛重新重視農業應用領域的研究,各項資金投入亦逐步增大。 微孔盤分析儀(Microplate reader)為生物學相關最常見的儀器之一,廣泛地應用在如農業科學、食品和環境科學、臨床檢驗等領域。尤其在微孔盤分析儀(Microplate reader)為生物學相關最常見的儀器之一,廣泛地應用在如農業科學、食品和環境科學、臨床檢驗等領域。尤其在如農藥殘留檢測、食品安全評價、動物疫病檢測和微生物分類學應用上,扮演承載大量工作的重要角色。 本期我們透過幾個常見的案例來介紹微孔盤分析儀的應用方式,並希望能進一步刺激研究者們產生更多的創新想法。 【應用專輯下載】 下方的應用手冊將詳細介紹微孔盤分析儀在多方面的應用及優勢表現: 多功能全波長微孔盤分析儀具有多功能全波長微孔盤分析儀具有調節任意波長優勢,更適合用於高通量光譜分析 酶的活性分析也是常見的檢測應用方向之一,可以用於探究植物本身酶的功能和植物提取物對各種酶活性的影響 在植物信號轉導研究在植物信號轉導研究蛋白之間的相互作用、ROS含量、鈣信號傳導等 植物領域應用 (簡中)   【輕鬆一刻】       【好評推薦】 【聯絡我們】

【線上講堂】運用AI人工智慧加速神經細胞的影像表型分析

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【主講者】 Oksana Sirenko博士, 高級應用科學家, Molecular Devices公司 Matthias Fassler博士, 科學客戶經理, Genedata公司 【摘要】 在藥物開發與疾病模式建立過程中,如神經發展、腫瘤生長等,研究瓶頸常來自大量的多維影像擷取和複雜的表型分析。目前高內涵系統雖可以解決部分難點,獲得充足的海量資料,但面對多樣化的細胞型態變化與相應的分析參數調整,仍需耗費研究者大量時間。 隨著電腦類神經網路技術成熟,以深度學習為基礎(Deep learning-based, or Artificial intelligence-based)打造出的分析工具,已經 可以通過減少分析形態變化中所需的工作與專業知識來解決這些挑戰。 本次網路研討會,我們將展示結合 ImageXpress Micro Confocal 共軛焦高內涵系統和以 Genedata深度學習平台 ,以 人源神經iPSC細胞的神經毒性分析為例, 展示 一套嶄新的解決方案 。   本研討會將會探討: ① 如何運用IXM Confocal高內涵系統,篩選神經毒性和神經突生長; ② 從影像擷取、到影像量化及資料探勘 一體化的工作流程全貌; ③ Gendata Imagence軟體的工作流程展示; ④ 使用Genedata Imagence軟體進行神經毒性定量分析的展示 。 【Genedata公司簡介】 Genedata公司成立於 1997 年 ,總部位於瑞士,並在 德國、日本和美國 設有辦事處。 他們提供一系列先進的 軟體解決方案 和 科學諮詢 ,致力於將生命科學資料轉化為智慧分析結果,憑藉結合深入的領域專業知識平台屢獲殊榮。 Genedata Imagence是一套以 深度學習 為基礎開發出的的分析自動化解決方案,與Molecular Devices的高內涵系統整合後,深度學習自動捕捉特徵並進行表型分類, 大大減少了圖像分析時間,同時提供高品質、具再現性的結果。 實現了革命性的 一體化影像分析工作流程 。 現在,每個生物學家都可以很容易地控制和分析高內涵影像的結果,使高內涵可以更廣泛地應用於不同的科研領域。   【好評推薦】 Molecular Devices公司總裁Susan Murphy女士評價到: “我們的ImageXpre

【應用專輯】斑馬魚等模式生物的高通量篩選方法介紹

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【簡介】 自從 20 世紀 70 年代美國俄勒岡大學的George Streisinger教授利用斑馬魚進行遺傳學及發育生物學方面的研究以來,斑馬魚已越來越多地被應用於人類疾病的研究中。   斑馬魚由於其與人類的高度生物相似性,成為了一種有用的藥物開發模型。如專業從事斑馬魚臨床前藥物評價的Zygogen公司,使用ImageXpress系列高內涵篩選系統進行包括血管生成、毒性篩選等多個應用方向的藥物評價,使用斑馬魚模型對化合物進行多濃度梯度的劑效關係的研究,並繪製需要至少十個以上樣品才能準確擬合的Dose-Response曲線並計算得到IC50。 此外,由於斑馬魚體積小,所以可以放入微孔板中用化合物處理,然後其表型能使用高內涵篩選系統來進行檢測。 基於斑馬魚的體內實驗應用有大量的已開發的人類疾病斑馬魚模型如: • 代謝綜合症:肥胖(內臟肥胖)、 血脂異常、脂肪肝、糖耐受失調  • 人類癌症細胞異種移植:腫瘤血管生成、遠端轉移  • 循環相關疾病:心力衰竭、藥物誘導的心率失調  • 神經相關疾病:耳聾、視力障礙、嗅覺失調、癲癇、發育紊亂、睡眠喚醒障礙、肌營養不良(ALS)等 使用ImageXpress系列高內涵篩選系統來檢測斑馬魚胚胎模型具備以下三個主要優勢: 高效率:使用完整生命體在三維環境下幾天就能評估上萬個化合物 高靈活性:高內涵適合篩選很寬範圍的疾病和毒性模型,甚至不局限於斑馬魚 高品質:通過自動高速Z-stack保持拍攝在最佳焦平面,避免景深帶來的不清晰 【了解更多】 《模式生物高通量篩選之新方法介紹》 包含實驗案例 “ 點擊下載 ” 參考文獻: 1. Zhang, B., et al., Quantitative phenotyping-based in vivo chemical screening in a zebrafish model of leukemia stem cell xenotransplantation, PLoS One, 2014 Jan 15; 9(1).   2. Umemoto, N., et al., Fluorescent-based methods for gene knockdown and functional cardiac imaging in zebrafish,