Molecular Devices

Z 因子(Z-factor)的由來 『HTS技術』(High Throughput Screening, 高通量篩選)是80年代後期發展起來的一種藥物篩選新技術，能夠準確、快速地從大型化學物庫中鑒定活性化合物（“Hits”），逐漸成為 新藥開發 中重要工具。 檢測中的所有數值都有一定程度的變化範圍，這是由於每種檢測方法的性質、儀器和人為的隨機誤差引起的擾動所造成。客觀上 測量變化越小，所選出的 Hits的“真實”可信度就越高 。 有兩種指標能用來約略表示檢測的品質： 1：訊號與雜訊的比值（S/N ratio） 2：訊號與背景的比值（S/B ratio）。 S/B的運算式定義為： S/B= mean signal mean background S/B值提供訊號與背景的比值，但無法顯示訊號和背景的變動差異 S/N 的運算式定義為： S/N= mean signal-mean background SD of background 相較於S/B，S/N值有針對背景值的變化作考量，因此在相同平均訊號與背景差異下，背景變動越小則S/N值越高。但S/N值並無考量到訊號的變動。 可是，這兩個指標都無法充分考量 樣品和背景測量的變異性 以及 訊號的動態範圍 ，因此都不能很好的反映檢測品質。 直到 1999 年，Zhang 等人定義了一個 “Z因子” (Z-factor) 作為評量標準，此係數可有效克服上述弱點，更適用於評估 試驗品質 。 Z因子它還有以下特點： 1：是 無因次量 (Dimensionless Quantity)的參數，因此適用於不同檢測分析的比較。 2：不僅為比較和評估分析的品質提供了有用的工具，還可 用於分析的優化和驗證 。 【 Z 因子的方程式 】 通常在驗證HTS 分析時，會將未知樣品與對照組一起進行分析。驗證測試中包含 陽性對照組 與 陰性對照組 的多個樣品測試，評估在活性範圍的兩個極端情況下，實驗再現性和訊號變化。其中陽性對照組平均值與陰性對照組平均值之間的差異就是檢測的 動態範圍 。 Z因子的方程式定義為： Z=1- 3(SD of sample+SD of control) |mean of sample-mean of control| Z 因子對資料可變性以及訊號動態範圍都可感應。例如當分子接近零(代表樣品與背景值的標準差極小)，或者當分母接近無

發表：Molecular Devices (HK) 【 前言 】 最近台灣疫情升溫, 診所又出現了施打疫苗的熱潮，但是疫苗到底是怎麼起作用的呢？ 為什麼注射疫苗之後還需要帶口罩和注意防護呢？ 國家又為什麼要號召全民接種呢？ 所有的問題，全都跟一個它有關—— 抗體 (Antibody) 。 我們接種疫苗的過程，可以理解為就是為這些 “識別系統” 發送“通緝令”的過程，只有足夠多的人群收到了這份“通緝令”，病毒的傳播才可能被阻斷。 但病毒也不是一成不變的，尤其像新冠病毒這種 RNA 病毒，單鏈RNA具有不穩定性，複製錯誤時不像 DNA 一樣有另一條鏈作為修復的範本，所以容易產生變異。 病毒一旦變異，對於體內的抗體來說，就像是易了容，有些易容沒有遮蓋到他們的特徵（特異性識別部位），拿到過通緝令的抗體仍舊可以將它們識別出來，但如果特異性識別部位發生了改變，抗體就沒辦法認出他們了。如果不小心感染了這類變異株，就仍然有感染發病的可能性。     抗體為整個免疫過程中的“識別系統”，而這個“識別系統”本身的“靈敏度”和“追蹤能力”就很重要了，這就是『 抗體親和力(Affinity)』 。 抗體親和力指的是抗體和抗原決定簇之間的結合力，其大小是評價抗體效果非常重要的指標。測量抗體對特定抗原的親和力，對於篩選抗體十分重要。 在生物藥物研發中，抗體親和力測量意義重大，如 單株抗體 ，測量抗體親和力，可以為適應不同用途選擇單株抗體提供依據，另外測量抗體親和力在早期挑選Hybridoma單株抗體，可以達到節省實驗成本、縮短實驗週期的目的。 親和力 是又稱 『解離平衡常數 Kd』 (單位 mol/L和濃度單位一致)，是表示可逆反應過程中 反應物 (ex抗原、抗體)和 最終產物 (ex抗原-抗體複合物)之間的相對狀態的特徵參數。 親和力的強弱決定了最終決定反應完成時可逆反應 各組分相對多少 。 我們可以通過幾個化學反應案例來做說明。 範例 1： 氫氣和氫氣和氧氣在點燃的條件下生成水 氫氣 H 2 氧氣 O 2 反應終止後的體系內物質 莫耳濃度 2 1 H 2 O 莫耳濃度 >2 1 H 2 O 和 H 2 莫耳濃度 <2 1 H 2 O 和 O 2 化學反應進行到底的結果是某一類反應物反應完全，有此類反應的過程和結果特性的反應稱之為不可逆反應。 範例2： PD1 抗原（CD279